PRACTICA 17: CREATININA

PRACTICA NUMERO 17

11/01/2018

OBJETIVOS:

Determinación cuantitativa de creatinina.

UTILIDAD CLÍNICA:

La creatinina es el resultado de la degradación de la creatina, componente de los músculos y puede ser transformada en ATP, fuente de energía para las células.

La producción de creatinina depende de la modificación de la masa muscular. Varia poco y los niveles suelen ser muy estables.

Se elimina a través del riñón. En una insuficiencia renal progresiva hay una retención en sangre de urea, creatinina y ácido úrico.

Niveles altos de creatinina son indicativos de patología renal.

El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

FUNDAMENTOS:

El ensayo de la creatinina esta basado en la reacción de la creatinina con el picrato de sodio descrito por Jaffé.

La creatinina reacciona con el picrato alcalino formando un complejo rojizo. El intervalo de tiempo escogido para las lecturas permite eliminar gran parte de las interferencias conocidas del método.

La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra ensayada.

APARATAJE:

-Espectrofotometro para lectura a 492 nm.

MATERIALES:

-Pipeta automatica y puntas de pipeta.

-Suero.

-Cubetas de espectrofotometria.

-Tubos de ensayo de 3 ml.

REACTIVOS:

-R1 ( Reactivo Picrico ): Acido picrico.

-R2 (Reactivo Alcalinizante): Hidroxido sódico.

-CREATININE CAL: Patrón primario acuoso de Creatinina.

PROCEDIMIENTO:

-Preparar el reactivo de trabajo (RT) mezclando volumenes iguales de R1 y de R2.

-Pipetear en una cubeta:

               *Blanco: 1ml de RT.

               *Patrón: 1 ml de RT, 100 microlitros de Patron.

               *Muestra: 1 ml de RT, 100 microlitros de Muestra.

-Mezclar y leer rapidamente en el espectrofotometro, primero se lee al cabo de 30 segundos y luego al cabo de 90 segundos de la adicion de la muestra.

RESULTADOS:

Blanco: 0.

Patron: 30 segundos  "-0.011" y 90 segundos " 0.026".  RESULTADO FINAL: 0.037.

Muestra: 30 segundos "0.336" y 90 segundos "0.382". RESULTADO FINAL: 0.046.

Calculos:     (0.046/0.037) x 2: 2.48 mg/dl de creatinina en la muestra.

                      Factor de conversion: 2.48 x 88.4=219.232 microlitrosmol/L.

Da un valor un poco elevado ya que los valores de referencia van de 0.7 a 1.4 mg/dl en hombres y de 0.6 a 1.1 mg/dl en mujeres.

OBSERVACIONES:

-Tener maximo cuidado con el R2 porque provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves.